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基因siRNA套装

针对客户不同应用场景，基叶生物重磅推出多种套装，使科研更方便！

siRNA套装为多条保证有一条有效，出现无效情况，请联系对应销售，进行免费重新设计，如下为套装售后注意事项：

在细胞本身转染效率能够达到80%及以上转染效率，且目标基因本底的表达丰度和内参GYPDH/β-actin的Ct值在15个Ct以内的情况下, siRNA可达到70%以上的沉默效果。若经qRT-PCR鉴定，套餐中3/4条siRNA均未达到70%或以上的沉默效果，基叶将根据您提供的实验结果进行分析。如核实为siRNA本身效果不佳，可免费重新设计并合成针对靶基因的2条新的siRNA。特殊物种（除人，大鼠，小鼠以外）的基因，lncRNA/circRNA不享受此售后条款。

siRNA转染常见问题小结：

1. 转染率如何计算？                                                                          

通过同视野明场图和荧光图进行merge或者对比，来确定被标记上荧光的细胞占整个视野细胞的百分比，从而确定细胞的转染效率大概为百分之多少。

某些细胞对荧光染料的粘附比较严重，且Cy3、Cy5为脂溶性染料，可能会造成假阳性结果， 所以通过激光共聚焦显微镜成像的方式检测会更好一些，并依靠经验判断真假阳性信号。所以对于细胞的转染效率检测一般建议用FAM标记的RNA来进行检测。

2. 目的siRNA/miRNA标记荧光，同时检测转染效率和作用效果可以吗？

为尽量避免对目的 siRNA/miRNA作用效率的影响，通常建议选择用荧光标记的siRNA NC，miRNAmimic/inhibitor NC来检测转染效率。也可以对目的siRNA/miRNA mimic/inhibitor标记荧光，同时检测转染效率和作用效果，但可能会有标记后siRNA/miRNA mimic/inhibitor失效的风险。

3. 荧光标记的NC的转染效率检测能否代表目的siRNA/miRNA的转染效率？是否每次实验都必须设置荧光对照组？

转染效率的高低主要由细胞自身及所选择的转染试剂和转染方法等相关，同等实验条件下，siRNA的转染效率是相近的，荧光标记的NC转染效率可以近似认为等同于目的siRNA/miRNA。在具体的实验中，荧光对照不一定需要每次实验都做。但如果每次实验都做一个荧光对照组/阳性对照组，将会更加便于排除一些实验问题。